单克隆抗体是在抗原刺激下特异性与抗原结合的一种免疫球蛋白。抗体由浆细胞分泌，浆细胞由B细胞转化而来。每个B细胞株产生自己的抗体，而且每个细胞株只能产生一种抗体，对抗它能识别的特定抗原决定因子。单克隆抗体是指从一株单一细胞系产生的抗体。

1、动物免疫：动物的B淋巴细胞受特定外来抗原刺激后，可大量增殖为浆细胞，分泌对抗抗原的抗体。该抗体具有特异性。动物免疫功能是用特定的外来抗原对动物进行一次或多次免疫，刺激可分泌该抗原的B淋巴细胞增殖，从而获得大量产生特定应答的B淋巴细胞。

2、细胞融合：B淋巴细胞受到外来抗原刺激后，可分泌抗体，但在体外存活较短时间(长达两周)后死亡；骨髓瘤细胞不分泌任何免疫球蛋白，但可以在体外存活很长时间。如果将这两种细胞的特性与水结合，就可以得到既能分裂秦抗体，又能在体外存活较长时间的细胞。但在杂交过程中，必然会产生混合物，因此有必要进一步筛选唯一有用的杂交瘤细胞。

3、杂交瘤细胞的筛选：用HAT培养基(H-次黄嘌呤、A-氨基喋呤、T-胸腺嘧啶）进行筛选。DNA合成有内源性和外源性两种方式。内源性途径是在二氢叶酸还原酶催化下，利用谷氨酰胺或单磷酸尿苷酸合成DNA；外源性途径是利用次黄嘌呤或胸腺嘧啶在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)或TK(胸腺嘧啶激酶)催化下修复DNA的合成。

HAT培养基中的氨基喋呤是二氢叶酸还原酶的抑制剂。因此，它可以有效地打破DNA合成的内源性途径。B淋巴细胞具有HGPRT和TK这两种酶，因此在内源性途径被阻断后，仍可在帽状培养基中利用次黄嘌呤和胸腺嘧啶完成合成。但是，B淋巴细胞是正常细胞，不能存活很长时间。

杂交瘤细胞遗传了B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的双重特性，可以合成HGPRT和TK，从而在HAT培养基中存活较长时间。与某些细胞工程抗体相比，单克隆抗体确实具有许多优点，这使得它们得到了广泛的应用。然而，仍有改进或进一步研究的余地。常规利用杂交瘤或噬菌体展示技术一般需要3-6 个月，而莱德伯特（北京）生物科技有限公司的Beacon这款设备仅需 3 天即可获得特异性抗体序列。可以直接在 0.5nl 体系中分离和检测单个浆细胞，从中筛选表达特异性抗体的目标细胞，并获取其重链和轻链 mRNA，反转录后即可直接用于测序和优化。

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