单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具。自1975年杂交瘤单克隆抗体技术出现以来，单克隆抗体已广泛应用于生命科学研究和临床检测诊断，并为许多领域的发展做出了不可估量的贡献。目前，单克隆抗体制备技术包括杂交瘤技术、EBV转化B淋巴细胞技术、噬菌体展示技术、转基因小鼠技术和单克隆B细胞抗体制备技术。

传统小鼠杂交瘤单克隆抗体技术的基本过程是将免疫小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞融合，然后选择既能无限增殖又能分泌抗体的小鼠杂交融合细胞。但该方法获得的小鼠抗体免疫原性高，半衰期短，往往临床疗效不显著。即使小鼠单克隆抗体通过基因工程完全人源化，也不可能完全消除小鼠单克隆抗体的免疫原性，临床疗效的提高仍然有限。

为了降低小鼠杂交瘤抗体和人源化抗体的免疫原性，提高抗体的生物学效应，许多研究者尝试各种方法获得完整的人源抗体。人杂交瘤技术是在小鼠杂交瘤技术基础上发展起来的一种抗体制备技术。该方法是将免疫的人或小鼠B细胞与人骨髓瘤细胞融合，获得无限传代和分泌抗体的混合融合细胞。该技术明显克服了小鼠杂交瘤技术的免疫原性，但仍存在许多局限性，如人类骨髓瘤细胞系非常有限，细胞融合成功率低，容易造成染色体丢失。针对上述缺陷，研究人员利用EB病毒(Epstein Barr virus, EBV)在体外感染正常静态B细胞并将其转化为永生性淋巴细胞系的特点制备分泌人类单克隆抗体的杂多瘤细胞，即EBV转化B细胞技术。然而，EBV转化的B细胞系不是恶性肿瘤细胞，不易克隆，抗体产量低，未得到广泛应用。

噬菌体展示技术是一种广泛应用于体外筛选人抗原特异性抗体可变区基因的方法。噬菌体展示是将抗体DNA序列插入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使抗体随着噬菌体的重组而在噬菌体表面展示的一种生物技术。该方法简单，无需B细胞培养过程，但所获得的抗体在人体内不表达，可能导致构象改变和抗原特异性丧失。此外，由于抗体重链和轻链的随机组合，无法维持抗体重链和轻链的自然配对。

此外，转基因小鼠抗体制备技术在破坏小鼠内源性抗体基因后，引导人抗体基因，再用靶抗原免疫转基因小鼠，在体内表达人抗体。该方法具有较高的抗体收率和亲和力，但小鼠和人类免疫系统组成的差异限制了其应用前景。

近年来新兴的单b细胞抗体制备技术是一种体外克隆表达单抗原特异性b细胞抗体基因的技术。该方法保留了轻链和重链可变区自然配对的特点，具有基因多样性好、效率高、人源充足、细胞数量少等优点。莱德伯特（北京）生物科技有限公司的Beacon这款设备轻松确保 99.5%的单克隆性，常规有限稀释等方法需要多轮操作并结合多种方法来寻找和确认单克隆性，事倍功半。而 Beacon 可直接培养目标细胞，所见即所得，可确保每个 NanoPen 仅有 1 个细胞，自动移除可能存在的多细胞，从而一轮Beacon 就轻松达到 99.5%的单克隆性。

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